lnu.sePublications
Change search
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf
Analysis of the specificity and thermodynamics of the interaction betwwen low affinity antibodies and carbohydrate antigens using flourescence spectroscopy
University of Kalmar, School of Pure and Applied Natural Sciences.
Responsible organisation
2005 (English)In: Journal of Immunological Methods, ISSN 0022-1759, Vol. 297, no 1, p. 203-211Article in journal (Refereed) Published
Place, publisher, year, edition, pages
2005. Vol. 297, no 1, p. 203-211
Keyword [en]
Carbohydrate, Fluorescence, Monoclonal antibody, Specificity, Transient binding, Weak affinity
National Category
Industrial Biotechnology
Research subject
Natural Science, Biotechnology
Identifiers
URN: urn:nbn:se:hik:diva-644OAI: oai:DiVA.org:hik-644DiVA, id: diva2:1900
Available from: 2007-12-13 Created: 2008-11-05 Last updated: 2010-03-09Bibliographically approved
In thesis
1. Development of Flourescence-based Immunosensors for Continous Carbohydrate Monotoring: Applications for Maltose and Glucose
Open this publication in new window or tab >>Development of Flourescence-based Immunosensors for Continous Carbohydrate Monotoring: Applications for Maltose and Glucose
2007 (English)Doctoral thesis, comprehensive summary (Other academic)
Abstract [en]

Weak affinity interaction of monoclonal antibodies and carbohydrate antigens can be detected and quantified by alterations in the antibodies' intrinsic tryptophan fluorescence. These weak/transient binding events have been monitored by total internal reflection fluorescence (TlRF) by facilitating the change in intrinsic tryptophan fluorescence. This immunosensor followed instant changes in the antigen concentration with rapid association- and dissociation rate constants reaching equilibrium in a short time, without the need for regeneration. Furthermore, in a competition assay with extrinsic fluorescence labeling, it was established that Förster/fluorescence resonance energy transfer (FRET) can be applied for weak and transient interactions. By entrapping components in small semipermeable capsules, aconvenient flow system was fabricated allowing on-line measurements of maltose. Quantification of maltose concentration was achievable in the mM-range without need for regeneration.High specificty for maltose was exhibited in crude food-samples with quantification in accordance with batch analysis.

Furthermore, a monoclonal antibody was developed for potential use as a glucose immunosensor for diabetes. Its ability to interact with glucose was determined by competitive weak affinity chromatography (WAC) to approximately 19 mM in dissociation constant. This antibody was developed to bind monosaccharides, especially glucose, by utilizing crossreation with a carbohydrate dextran polymer. Selectivity for glucose was greater than for the similar monosaccharides, mannose and galactose. This antibody, or a fragment, in a fluorescence platform is an alternative to monitor glucose in vivo where other glucose-binders might fail.

Abstract [sv]

Att känna igen en motståndare är viktigt i många sammanhang, inte minst i kroppens immunförsvar som är utvecklat för att angripa främmande ämnen i kroppen. Antikroppen spelar en central roll i immunförsvaret där den lär sig att känna igen sin motståndare (antigen) och därmed binda sitt antigen. De antikroppsproducerande cellerna kan användas i laboratoriet för att producera antikroppar som härstammar från försöksdjur. I denna avhandling har antikroppar använts som binder betydligt svagare till antigenet än vad man i de flesta analyser använder sig av för att t.ex. detektera sjukdomar. Antikroppar som binder till olika typer av socker, däribland maltsocker (maltos) och blodsocker (glukos) har studerats. Dessa antikroppar har använts för att undersöka hur hårt de binder till sitt antigen beroende på temperatur och om antikropparna kan känna igen liknande motståndare (korsreaktivitet). Fördelen med dessa svaga bindningar är att antikroppen snabbt kan binda in och släppa sitt antigen istället för att nästan permanent sitta på sitt antigen, som vid starka bindningar. Bindningens styrka (affinitet) har i avhandlingen studerats med hjälp av fluorescensteknik och affinitets-separation. Den maltosbindande antikroppen har använts tillsammans med fluorescensteknik för att designa två olika biosensorer (immunosensorer). Immunosensorerna kan mäta förändringen av maltoskoncentration över tid, vilket är attraktivt i t.ex. livsmedelsindustrin när man vill mäta maltoshalten kontinuerligt under tillverkningen. Den glukosbindande antikroppen har använts i affinitets-separation för att bestämma dess affinitet mot glukos och olika polymerer av glukos. En glukosbindande antikropp är åtråvärt för att t.ex. kontinuerligt mäta koncentrationen av blodsocker genom huden hos diabetiker och därmed minska antalet blodprover man idag behöver ta.

Series
Dissertation series / University of Kalmar, Faculty of Natural Science, ISSN 1650-2779 ; 42
Keyword
Carbohydrate, Diabetes, Immunosensor, , Glucose, Maltose, Weak affinity chromatograhpy, Kolhydrater, Glukos, Maltose, Affinitetskromatografi, Diabetes
National Category
Medical Biotechnology (with a focus on Cell Biology (including Stem Cell Biology), Molecular Biology, Microbiology, Biochemistry or Biopharmacy)
Research subject
Natural Science, Biotechnology
Identifiers
urn:nbn:se:hik:diva-45 (URN)978-9189584-75-4 (ISBN)
Public defence
2007-10-05, N2007, Norrgård, Smålandsgatan 24, Kalmar, 09:00 (English)
Opponent
Supervisors
Available from: 2007-12-13 Created: 2007-12-13 Last updated: 2010-03-09

Open Access in DiVA

No full text in DiVA

Other links

http://www.sciencedirect.com/science?_ob=MImg&_imagekey=B6T2Y-4FB9FRR-1-D&_cdi=4931&_user=745831&_orig=search&_coverDate=02%2F28%2F2005&_sk=997029998&view=c&wchp=dGLbVzW-zSkWA&_valck=1&md5=0dd6a0d210f90cdcc46899a6d10c26ae&ie=/sdarticle.pdf

Authority records BETA

Ohlson, Sten

Search in DiVA

By author/editor
Ohlson, Sten
By organisation
School of Pure and Applied Natural Sciences
Industrial Biotechnology

Search outside of DiVA

GoogleGoogle Scholar

urn-nbn

Altmetric score

urn-nbn
Total: 102 hits
CiteExportLink to record
Permanent link

Direct link
Cite
Citation style
  • apa
  • harvard1
  • ieee
  • modern-language-association-8th-edition
  • vancouver
  • Other style
More styles
Language
  • de-DE
  • en-GB
  • en-US
  • fi-FI
  • nn-NO
  • nn-NB
  • sv-SE
  • Other locale
More languages
Output format
  • html
  • text
  • asciidoc
  • rtf